測定一種農藥藥劑的藥效好壞，可通過室內毒力測定和林間藥效試驗。室內毒力測定主要是測定一種藥劑的毒性、毒力或比較幾種藥劑毒力的大小。室內試驗的結果，除可作為藥劑的初步篩選的根據外，還可為林間試驗提供參考。有時在林間發現的問題必須拿回室內作比較精細的試驗研究。林間試驗主要測定或比較藥劑在林間條件下的藥效，其結果比較接近實際情況，為生產防治提供可靠的依據。

    1．室內毒力測定

    進行室內試驗要注意：①供試生物應該是由同一環境下培養得來的，或采自林間同一環境的，在生理、發育上愈一致愈好。②供試藥劑必須純凈（原油或原粉），至少要有確切的有效成分含量。③在控制的條件下進行試驗，施藥要均勻一致。④試驗一般要求每種處理有3－5個重復，每個處理要有50－100頭昆蟲（菌類孢子一般為在顯微鏡10×10視野內有100個左右，每次計算必須移動玻片檢查3次）。⑤各種試驗必須設立對照。所設對照有：完全不處理的（在自然狀況下的），即所謂“空白”對照；不含有效成分的制劑或清水對照，用標準藥劑處理的對照。

    （1）殺蟲劑的毒力測定方法

    1）噴霧法：模擬林間實際防治情況下而設計的噴霧方法，為了減少試驗誤差，使每一個供試昆蟲盡量接受到相同的藥量，要求噴霧器有一定的壓力，使霧點大小一致，噴霧均勻。

    2）液浸法：將供試昆蟲分別放入不同濃度的稀釋藥液中浸漬一下，立即取出，放在吸水紙上吸去過多的藥液，移入每一組的盛器中，給以新鮮葉片作飼料，盛器上加蓋紗布或紗網，飼養于室內，記錄室溫，觀察不同時間下中毒死亡情況。

    3）藥膜法：將藥劑噴撒在一定面積的表面上，形成一層均勻的藥膜（常用墊有濾紙的培養皿，或將針葉在藥液中浸漬一下后取出），然后讓供試的害蟲在上面，任其與藥膜接觸一定時間后，再移回正常的容器中飼養，或就在接觸藥膜過程中，觀察中毒死亡情況。

    4）點滴法：用定量的藥液微滴，滴加在供試昆蟲的胸部背面，然后定時觀察中毒死亡情況。此法優點是：劑量可用每克蟲體接受的藥量（常用微克）表示，藥量容易控制，試驗誤差較小；缺點是費時，處理所用的溶劑、點滴的部位和液滴的大小等都可影響毒力。在采用本法時，應當考慮這些因素，盡量取得一致，才能得到準確的結果。

    （2）殺菌劑的毒力測定方法

    1）孢子萌發測定法：將不同的藥液噴布于玻片表面或平板上，定量滴加孢子懸浮液，藥液接觸后，經一定培養時間，鏡檢孢子萌發的百分率。

    2）抑菌圈法：將病原菌孢子或菌絲的懸浮液與瓊脂培養基混勻，冷凝后，在培養基平面放上消毒的并蘸有不同濃度藥液的圓形濾紙片（直徑6毫米左右），經定溫培養一定時間后，由于藥液的擴散作用，使病菌生長受到抑制，即形成“抑制圈”。測量抑制圈的大小，以比較殺菌劑的毒力。

    3）生長速率測定法：在瓊脂培養基中加入藥液，冷凝后接菌的方法，經24－48小時后，觀察菌落生長情況，計算生長速率，并與不含藥劑的對照組生長速度相比較。

    （3）殺蟲劑、殺菌劑的毒力表示方法：藥劑的殺蟲或殺菌毒力，常用“致死中量”表示，即殺死生物種群半數（50%）所需用的劑量（median lethal dose，毫克/千克）常簡寫為LD50。如果濃度表示劑量，則為“致死中濃度”，簡寫為LC50。殺菌劑則以ED50或EC50來表示，即抑制50%孢子萌發所需的劑量或濃度。

    在測定藥劑毒力時，一般常用一系列的劑量（或濃度）對多組生物分別測定死亡百分率，再以不同劑量與相應的死亡率畫成“劑量－死亡率毒力曲線”。在縱坐標從死亡率50%處引出一平行于橫坐標的線與曲線相交。該處的劑量（或濃度）即為LD50（或為LC50）。但是由于這一曲線是S形的，不易精確地求得LD50或LC50的數值，同時用S形曲線也不易與其他曲線進行比較。因此，必須把這一呈S形曲線改成一條直線，常用統計方法是將劑量用對數值表示，將死亡率用機率值表示，就可以將S形曲線改為一根直線，這一根直線常稱“劑量對數-機率值直線”。死亡率查機率（見附表2機率與死亡百分率換算表）。從這一直線的坡度，還可得知供試生物對該種藥劑敏感性差異的程度，即坡度越大，表示供試生物個體間差異越小；坡度越小，表示差異越大。

    室內毒力測定時，在不施藥的對照組中，出常出現少數自然死亡的個體，如果自然死亡率在5%以下，一般僅把處理組的死亡率減去自然死亡率即可得到校正死亡率。當自然死亡率達到5%~20~時，就不能用直接相減的方法，應按照下列公式計算處理組的校正死亡率，如果自然死亡率超過20%時，則該批供試生物不宜作試驗或試驗應重做。

    對照組生存率－處理組生存率

    處理組的校正死亡率(%)=---×100%

    對照組生存率

    2．林間藥效試驗

    林間藥效試驗的小區或大區的面積大小，取決于地形條件、林木種類、病蟲習性和試驗要求。用藥處理前后，必須調查病蟲害為害程度的變化，通常采用“隨機取樣” 方法調查，常有對角線法、大五點法、棋盤式法、平行線法、分行法等。病蟲害發生比較普遍，分布比較均勻，危害較重，可采用五點取樣法或棋盤式法；病蟲害分布不均衡，形成大小及形狀不相同的核心分布型，并自核心向外放射性蔓延，可采用平行線法。取樣大小（如標準株數）直接關系到結果的正確程度，應根據具體條件、病蟲種類等情況，決定取樣大小。例如調查金毛蟲蟲口密度時，蟲口密度大的，抽標準株數少些；蟲口密度小的，抽標準株數多些，一般約20－30株。

    藥效試驗結果，最常用的是害蟲死亡率、蟲口減退率、枯梢率等。病害試驗結果可用發病率、普遍率、感染指數等表示。一般當害蟲蟲口密度基本上是一定的，則處理后的蟲口數一定減少，而不會增加。對這類害蟲試驗結果的統計，只要計算死亡率或蟲口減退率即可。

    害蟲死亡率（或蟲口減退率）（%）

    施藥前害蟲平均活蟲數—施藥后害蟲平均活蟲數

    =----×100%

    施藥前害蟲平均活蟲數

    當自然死亡率在5%－20%，應進行校正。為此，在試驗設計時應加不施藥的對照區，這樣就能計算校正死亡率或校正蟲口減退率。

    害蟲校正死亡率

    施藥區死亡率（減退率）－不施藥對照區死亡率（減退率）

    =--- ×100%

    100－不施藥對照區死亡率（減退率）

    另一類害蟲（主要是蚜、螨）。它們的繁殖力很加，不僅對照區蟲口數要比施藥前增加，就是施藥區的蟲口數也有減有增。因此，運用上述校正死亡率或校正蟲口減退率（%）公式時，凡遇不施藥對照區蟲口數增加的，則在公式中改用“+”號。

    殺菌劑藥效試驗的調查及結果的處理方法也因病害種類、危害性質而異。如苗期病害，可隨機或定點取樣，檢查一定數量的苗株，計算發病率。根據施藥前、后的發病率，計算病害減退率或防治效果。

    病苗（株、葉、稈）數

    發病率（或普遍率）（%）= ---×100%

    檢查苗（株、葉、稈）數

    有些病害如落針病、葉斑病等，因同一植株上或不同植株上危害程度有輕重之別，可根據落針數或葉上的病斑數，分成若干等級，例如分為0、1、2、3、4、5等六級，級數可按具體情況或多或少。分別檢查藥劑防治區別和不施藥對照區的各級病葉數，計算防治區和對照區的病指情指數。計算方法如下：

    ∑（級別代表值×本級病株數）

    病情指數（或感病指數）（%）=---×100%

    檢查總株數×最高級別代表值

    式中：∑是各級乘積數值的總和。

    用病情指數進一步計算防治效果：

    對照區病情指數（或發病率）－防治區病情指數（或發病率）

    防治效果（%）=---×100%

    對照區病情指數（或發病率）

    關于除草劑的除草效果可用下式計算：

    對照區雜草數量（鮮重，克）－施藥區雜草殘留量（鮮重，克）

    防治效果（%）=---×100%

    對照區雜草數量（鮮重，克）